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帶你關注下BSL-2級生物安全實驗室建設的一點心得體會以及教訓!

點擊次數:396  更新時間:2022-11-29

高壓消毒滅菌鍋

微生物檢測這個命題相信大家都不會陌生,畢竟我們都是從事這方面工作的。在實驗室里,我們需要跟各種檢測方法、細菌真菌以及檢測設備等打交道,對微生物檢測領域也肯定會存在這樣或者那樣的問題,面對這些問題你是怎么解決的?你有哪些好的微生物檢測工作經驗?歡迎投稿分享你的心得體會圖片圖片圖片。


  今天,分享給朋友們一篇關于“GB 50346-2011《生物安全實驗室建筑技術規范》建設實驗室心得體會"的好文章,歡迎圍觀。


  實驗室建設需要考慮的因數比較多,具體分以下幾個方面:


  一、實驗室安全級別定位。


  首先就檢測實驗室的定位要清晰明確,是用于科研還是拿來生產和致病性有關的產品、還是用于飼養實驗動物以及做第三方檢測實驗室,我們的實驗室定位是第三方檢驗檢測實驗室,檢測一部分致病菌,所以定位也就是安全生物分級所對應的BSL-2生物安全實驗室,主要用于檢測致病菌以及一些簡單的病毒學檢測。


  個人理解的生物安全實驗室根據實驗對象的生物危害程度以及可采取的防護措施情況分成四級(方便記憶):


  1級—危害程度低,對健康成人及動植物不具有致病性,也就是說1級幾乎是無害的。


  2級—危害程度中等,對健康成人及動物不會造成嚴重危害,可以被有效預防及治療。重點在于可以有效治療和有效預防。是可控的。


  3級—危害程度高(標準寫高個體危害,低群體危害),對人及動物有高危害性,直接接觸或通過氣體傳播,具高度感染性,有預防和治療措施。也就是可預防及救治的,但效果就是個未知數了。


  4級--危害程度很高(高個體危害,高群體危害),對人和動物及環境高度危險,氣溶膠傳播或傳播路徑不明,具有未知致病因子,沒有預防及治療措施。簡單的講就是無藥可解,當然樂觀的講這種無藥可解也是相對的,4級危險級別當我們的醫療手段發達到一定程度,也可降為3級安全級別,比如SARS病毒,目前已歸類到三級范圍,有預防和治療措施。


  中華人民共和國衛生部制定的《人間傳染的病原微生物名錄》就是根據危害程度及安全實驗室的安全級別來進行歸類的。


  二、BSL-2生物安全實驗室建設需要注意的關鍵設備。


  通過是否經過空氣傳播的生物因子實驗室分成a(不經空氣傳播)b(經空氣傳播)二類實驗室,b2類實驗室指不能通過有效利用安全隔離裝復制進行操作的實驗室。


  BSL-2生物安全實驗室指生物安全級別為2級的生物實驗室。


  b2實驗室的具有2個關鍵設備:生物安全柜,高壓蒸汽滅菌器。


  要建設好BSL-2級生物安全實驗室除了要把實驗室基礎設施建設好之外就需要把這2個關鍵設備落實好。


  具體有以下幾點:


  2.1生物安全柜及高壓蒸汽滅菌鍋的選購要求。


  須購買具有生產資質正規廠家的生物安全柜的,并且根據實驗室建設情況購置相匹配的生物安全柜。


  因生物安全柜須與房間及周圍通風系統密封連接,所以需要實驗室建設還未完成之前在購買完成并放置匹配布局位置。如果房子造好了再去整安全柜就不那么好改造了。由此引申的一些較大的設備,如二人或三人聯排的超凈臺,-80℃冰箱以及其他大型實驗設備需考慮門高門寬以及用電符合問題。


  高壓蒸汽滅菌器,建議購買日本松下或廈門致微的滅菌鍋,這2款滅菌鍋的好處就是傻瓜式全自動,滅菌鍋密封性好,故障率低,且具有專用排氣筒,對周圍環境造成濕度影響較小,安全系數高等特點。如果對滅菌鍋使用有較高經驗也可購買上海博迅50或70L滅菌鍋,也比較方便。不建議因節約費用而購買手提式滅菌鍋,因具有體積小,升降溫膨脹快以及需要手動控制等缺點。


  2.2生物安全柜校檢的具體要求。


  由于校檢機構及校檢人員的綜合素質良莠不齊,所以在購置了生物安全柜之后,校檢需就校檢三個重要指標和校檢機構進行確認,這三個主要技術指標就是:檢漏,風速,潔凈度。


  檢漏是生物安全柜特色的一個項目,是防止污染物回流到實驗室造成污染的的一個預防性檢查。


  風速,生物安全柜的原理是采用負壓雙層箱體結構,風機在頂部產生正壓,把一定風速的的垂直風(II級生物安全柜要求風速達到0.5m/s)送到操作臺,進氣流順著操作臺下面或側面的隔柵,向操作臺后面向上流動,與從后面隔柵流下的下沉氣流相遇?;旌?,進入回風腔,然后在進入風機入口形成負壓。30%的氣流經頂部高效過濾器過濾后排出,從而阻止污染物排出外界。剩下70%經下沉氣流高效過濾后,再次形成潔凈循環風(II級生物安全柜的循環風和排風比例為70%:30%),,避免柜內產品或樣品收到污染。


  潔凈度,II級生物安全柜要求潔凈度達到100級。


  GB/T 16294-2010醫藥工業潔凈室(區)沉降菌測試方法的附錄C附有技術要求半小時沉降菌不得超過1CFU/皿(萬級不超過3CFU/皿,10萬級不超過10CFU/皿)。圖片


  2.3高壓蒸汽滅菌鍋校檢及使用要求。


  目前就高壓蒸汽滅菌鍋要檢定和不檢定的爭論一直持續不斷,個人建議還是請專人來校檢為宜,畢竟壓力容器,馬虎不得,尤其有些操作員只會操作并不一定懂得結構及安全須知的一些關鍵點。


  高壓蒸汽滅菌鍋需要校檢的部分主要是溫度和壓力。溫度要校檢我們實驗滅菌所需的溫度點,比如121℃,以及滅糖化培養基的115℃,以及保溫用的100℃等,如果有單位使用134℃,也校檢一下;壓力方面,需聯系專門的壓力校檢機構比如特種設備單位然后商議校檢壓力表的事宜。


  2.4校檢報告的確認。


  經相關機構校檢之后并出具的報告,我們取得報告后需對校檢報告進行確認,確認不能流于形式,這是確認我們的設備是否滿足我們使用要求的很重要的一步,首先確認報告上面關于送檢單位信息、儀器型號、出廠編號等是否和我們的信息一致,再就是查看校檢單位所使用的標準是否適宜。


  然后根據檢定規程、校檢技術規范來核查此項設備校檢結果是否滿足要求,還要根據我們所使用設備需要來評價是否滿足實驗需要。如有問題需要和生產商及校檢單位進行溝通協商解決。


  三、從事微生物檢驗檢測的實驗室建設需要注意的方方面面。


  生物實驗室布局除了設計各檢測實驗室外,還要設計緩沖區域以及物流之中需要設計傳遞窗,并且具有紫外殺菌和單向聯動開啟功能(說白了就是放入開窗的時候里面的人不能同時可以開啟傳遞窗)。


  設計以簡潔實用、流向清晰為主。不要設計成迷宮一般,人走進去都搞不清楚哪兒是哪兒,那么風流物流也就會亂糟糟的,這是教訓。


  生物實驗室建設時要充分考慮設備、流向、電力配置等因素,不然會造成房子造好了、拆門搬運體積較大設備,或儀器運行起來電力不夠等現象發生,或流向不清晰或有回路,造成交叉污染的可能性。


  單向流問題,生物實驗室建設的重點是清潔區和污染區的分區要明顯,所以潔凈風的流向以及人流、物流的走向很重要。


  生物實驗室要求潔凈風,需要安裝初、中、高空氣過濾裝置,風向一般有上送下排或上送上排,進風口應離地面2.5m以上,避開污染源。風流從潔凈區到較低污染可能區再到較高污染可能區,要盡量減少風的回流和渦流。排風速度也要在一個范圍內為宜,太高加速過濾器老化失效,太低帶不動室內空氣的流動,并且要本著“排風先于送風開啟,后于送風關閉"的原則。


  生物實驗室用電,一般穿墻或用套管,盡量不走明線避免造成清潔死角,并且漏電保護裝置要備全及合適。實驗室用水,一般按照實驗單元設置閥門及止回閥,洗手等設施靠近實驗室出口處為宜。室必須配備洗眼及應急淋浴裝置。防護區的污水處理裝置可采用化學消毒或高溫消毒滅菌方式。


  生物實驗室建設過程中選材一般選擇不銹鋼、銅質、無毒塑料等材質,建議不要選擇木質材料,以免霉菌污染。


  生物實驗室門牌須有清晰表示,專用的生物危險符號(網上可購買粘貼),填寫負責人及緊急聯系電話等信息。


  實驗室建設完成,驗收時候還需要注意的就是連接縫線,有許多實驗室從表面上看超凈間做的很漂亮,但仔細觀察,會發現連接線沒有拿膠粘好,或者排風口釘子沒有上牢固,等等這些細節都是很重要的。


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