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操作技巧|酶標儀維修

點擊次數:945次  更新時間:2022-11-23
  酶標儀即酶聯免疫檢測儀,是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器??珊唵蔚胤譃榘胱詣雍腿詣觾纱箢?,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析,測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。
 
  酶標儀實際上就是一臺變相光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同。光源燈發出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光,進入塑料微孔極中的待測標本。該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉換成相應的電信號。電信號經前置放大,對數放大,模數轉換等信號處理后送入微處理器進行數據處理和計算,然后由顯示器和打印機顯示結果。微處理機還通過控制電路控制機械驅動機構X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現自動進樣檢測過程。而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅動機構和控制電路,從而使儀器更小巧,結構也更簡單。
 
  酶標儀和普通的光電比色計有以下幾點差異:
 
  1)盛裝待測比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,對抗原抗體有較強的吸附作用,故用它作為固相載體。
 
  2)由于盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。
 
  3)酶標儀通常不僅用A,有時也使用光密度OD來表示吸光度.酶標儀可分為單通道和多通道2種類型,單通道又有自動和手動2種之分.自動型的儀器有X,Y方向的機械驅動機構,可將微孔板L的小孔一個個依次送入光束下面測試,手動型則靠手工移動微孔板來進行測量。
 

ELX-808美國寶特酶標儀

 


 
  在單通道酶標儀的基礎上又發展了多通道酶標儀,此類酶標儀一般都是自動化型的。它設有多個光束和多個光電檢測器,如 12個通道的儀器設有 12條光束或 12個光源,12個檢測器和12個放大器,在X方向的機械驅動裝置的作用下,樣品12個為一排被檢測.多通道酶標儀的檢測速度快,但其結構較復雜價格也較高。
 
  酶標儀維修注意要點:
 
  1、保持避光和干凈的室內環境,維持一定的濕度(30%-80%)。
 
  2、維持室內比較恒定的溫度,以20-22度為適宜。
 
  3、適用6-384孔板。96孔微孔板內每孔可檢測100-300u1溶液,檢測體積為200u1。
 
  4、384孔微孔板內每孔可檢測50-100u1溶液,檢測體積為80u1。
 
  5、檢測后的微孔板不要長期置于儀器插槽中,檢測完后就從儀器中取出,避免溶液蒸發腐蝕或損壞儀器內部光路系統。如果為有腐蝕性或揮發性溶液,請帶蓋檢測。
 
  6、對于熒光強度檢測,使用黑色不透明板。
 
  7、伴隨儀器的還有一塊紫紅色的適配板,在檢測96孔板和384孔板時候必須預先置于插槽中,然后再放入微孔板進行檢測。
 
  8、在連有電源的情況下,保持儀器24小時開機(對高能氬閃燈源沒有損耗),不要罩防塵罩以保持透氣和除濕。隔1-2個月關機重啟一次即可。
 
  進口酶標儀的檢定流程:
 
  1、外觀:儀器上應有儀器名,型號,,生產廠家,出廠日期和電源電壓;各調節旋鈕,按鍵和開關均能正常工作,外表面無明顯機械損傷,顯示文字應清楚完整。
 
  2、穩定性(漂移):選用492nm波長,在吸光度o.0A處,測定標稱值為1.0A的光譜中性濾光片(測定操作按儀器說明進行),記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測定值之差不應超過±0.00。
 
  3、吸光度測定的重復性:波長選擇同(三),在酶標板*排加注空白溶液,第二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復測定5次。記錄每次測定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對應孔吸光度值。
 
  4、吸光度測定的準確度:選用405,492和620nm波長,以空氣為參比,分別測定標稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用測試板代替酶標板,按儀器說明連續測定3次,按下式計算準確度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:為標準值)。
 
  5、測定速度:選用492nm波長,放人96孔酶標板進行測定,用秒表計測儀器打印出全部數據的時間。酶標儀除了在選購時,應盡可能自檢外,在使用中也應定期檢定,以保證酶標儀測定的有效性。附:200ttg/ml重鉻酸鉀溶液的配制將重鉻酸鉀固體試劑放人稱量瓶中(去蓋)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于干燥器內冷卻30min,在分析天平上準確稱取o.2829g,置于100ml燒杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗燒杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀釋至刻度線,搖勻。
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